液相色譜柱的損壞70-80%都是由于柱壓升高導致的，色譜柱使用了一段時間以后，壓力會有所升高，達到一定程度以后色譜柱就會報廢，如果在一天之內壓力升高了2-5個mpa，或者在幾次使用后壓力就翻倍的升高，這些都是異常狀況，那建議進行排除。一、色譜柱保存不當原因：色譜柱如較長時間不用，重新啟用后需按說明書的活化方法重新活化后再使用，否則也會出現柱壓升高，柱效下降。解決辦法：按說明書重新活化色譜柱。原因：除另有規定外，一般反相色譜柱都需保存在高比例有機相中，以防止微生物滋生。否則，重...

標準曲線法，分為外標法和內標法。外標法在液相色譜中用的較多。內標法準確但是麻煩，在標準方法中用的較多。1、外標法用被測化合物的純品作為標準樣品，配制成一系列的已知濃度的標樣。注入色譜柱的到其響應值（峰面積）。在一定范圍內，標樣的濃度與響應值之間存在較好的線性關系，即W=f×A，制成標準曲線。在完全相同的實驗條件下，注入未知樣品，得到欲測組分的響應值。根據已知的系數f，即可求出欲測組分的濃度。外標法的優點：操作、計算簡單，是一種常用的定量方法；無需各組分都被檢出、洗...

C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長度的不同，內徑的差異等多方面因素，呈現出不同選擇性。這樣，在市場上就出現了數百種具有不同分離選擇特性的C18色譜柱。對于傳統的C18色譜柱，pH值使用范圍通常為2～7，因為pH值高于8時C18固定相會受到限制。由于殘余硅羥基的存在，易對堿性化合物造成不可逆吸附，造成峰拖尾，影響分離與分析。pH值太低則會使鍵合的烷基脫落，而且對成分的分離達不到要求。1、酸性條件下C18的選擇為了改善C18色譜柱在低pH值時的穩定性，有人提出了空間位阻...

紫外檢測器（ultraviolet－visibledetector，UVD）是HPLC中應用廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質檢測限可達1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯使用。紫外檢測器主要由光源、分光系統、檢測池和檢測系統四大部分組成，從光源分光系統得到的特定波長的單色光通過檢測池時，一部分光被溶液中的吸光性溶質吸收，剩余的透射光到達檢測系統后光信號轉換成電信號...

色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。只有了解影響色譜柱性能的因素，才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。(1)硅膠純度硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質會影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形，易發生拖尾。(2)色譜柱尺寸填料床的長度和內徑，增加色譜柱長度，可以在一定程度上提高柱效，但也會升高壓力和導致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會增加橫向擴散，同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節約...

液相色譜檢測器是HPLC儀的三大關鍵部件之一。檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號。HPLC的檢測器要求靈敏度高、噪音低（即對溫度、流量等外界變化不敏感）、線性范圍寬、重復性好和適用范圍廣。1、按原理可分為光學檢測器（如紫外、熒光、示差折光、蒸發光散射）、熱學檢測器（如吸附熱）、電化學檢測器（如極譜、庫侖、安培）、電學檢測器（電導、介電常數、壓電石英頻率）、放射性檢測器（閃爍計數、電子捕獲、氦離子化）以及氫火焰離子化檢測器。2、按測量性質可分為通...

液相色譜分析柱包含EP-C18、WP-C18、EP-C8、WP-C8等，均是由一種全新的化學鍵合技術進行合成的。*鍵合技術的使用保證了色譜柱具有優異的分離特性，使一些通常難于進行的分離變得可能。液相色譜分析柱主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相)內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分...

色譜柱溫度，不僅影響色譜過程的熱力學因素，也影響傳質過程的動力學因素。柱溫變化，不僅影響柱前端壓力、載氣流速等，更重要的是對物質的分離、分析結果帶來影響。氣相色譜中，柱溫是影響化合物保留時間的重要因素。使用中，應注意柱溫的選擇，因為柱溫關系到：①色譜柱固定液的壽命。若柱溫高于固定液的最高使用溫度，則會造成固定液隨載氣流失，不但影響柱的壽命，而且固定液隨載氣進入檢測器，將污染檢測器，影響分析結果。②分離效能和分析時間。若柱溫過高了，會使各組分的分配系數K值變小，分離度減??；但柱...